Page 82 - 微生物学免疫学进展
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微生物学免疫学进展 2016 年 2 月第 44 卷第 1 期 Prog in Microbiol Immunol,Feb. 2016, Vol. 44 No. 1 · 7 7 ·
(Dark-field microscope,DFM)检查、直接免疫荧光试 用 [7] ,但由于结果主观判断强,容易出现假阳性和
验( Direct immuno fluorescence assay,DFA) 以及多 假阴性,因此目前常用于梅毒定性和半定量试验。
功能显微诊断仪(Multi-function microscopy diagnosis RPR 和 TRUST 也为 VDRL 试验的改良版,都是分别
instrument,MDI) 检测等。 DFM 可直接观察病灶分 在抗原中加入活性炭颗粒和甲苯胺红颗粒作为指示
泌物中的梅毒螺旋体,是诊断早期梅毒的有效方法, 物,肉眼易于判断实验结果,故临床上使用也比较广
但因其敏感性常较低,且由于梅毒螺旋体形态与常 泛,目前常作为梅毒的筛选,梅毒患者治疗后滴度的
分布于口腔、直肠部位的齿垢密螺旋体(Treponema 检测及疗效观察。 以上方法虽可适用于各期梅毒,
denticola)、屈折密螺旋体( Inflectional treponema) 和 但对一期梅毒早期、晚期梅毒及经治疗后的梅毒患
蚀疮溃疡密螺旋体(Treponema phagedenis)等非常相 者、潜伏期梅毒和神经性梅毒敏感性相对较差,特异
似,不易区分,因此此法对口腔、直肠病灶部位样本 性也不强,且由于多种疾病患者(如某些急性感染
不适用 [2] 。 DFA 是借助荧光显微镜观察经荧光标 性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤患者) 及怀孕早期妇
记处理的样本中梅毒螺旋体的一种技术方法,较之 女、老年人群等都可能存在类似的类脂质抗体,常会
暗视野显微观察阳性率有所提高,且还可以对病理 发生低滴度生物学假阳性反应 [8] ,需要结合梅毒螺
组织切片进行检查,但该法对实验人员的技术要求 旋体抗原血清试验确证,并结合临床表现进行鉴别。
较高,目前还没有在实验室广泛使用 [3] 。 MDI 是一 2. 2 梅毒螺旋体抗原血清试验 传统的梅毒螺旋
种集相差对比、暗视野及偏振光为一体的可变投影 体抗原血清试验包括荧光密螺旋体抗体吸收试验
显微诊断系统,可直接从患者身上获得样本且不需 (Fluorescent treponemal antibody absorption test,FTA-
做任何的预处理,直接用该仪器进行检测诊断的一 ABS)、 梅毒螺旋体血凝试验 ( Treponema pallidum
种方法 [4] 。 hemagglutination assay,TPHA)、梅毒螺旋体颗粒凝
2 血清学检测梅毒 集试 验 ( Treponema pallidum particle agglutination,
TPPA),它们都是以梅毒螺旋体 Nichols 株全病原体
梅毒血清学检查主要用于二期和三期梅毒的诊 作为抗原。 FTA-ABS 法以 Nichols 株全病原体作抗
断,对于评判梅毒病程的发展、预后以及临床治疗药 原,与加入经吸收剂处理过的患者待测血清形成抗
物的疗效都有着十分重要的意义。 梅毒血清学试验 原抗体复合物,用荧光素(FTTC)标记的抗人免疫球
包括非梅毒螺旋体抗原试验和梅毒螺旋体抗原试验 蛋白追踪,抗原抗体复合物在荧光显微镜下发出绿
两大类。 前者常用于临床筛选及疗效的观察,后者 色的荧光,即为阳性。 该法被认为是梅毒检验的
主要是用于判定试验。 “金标准”,具有特异性高、敏感性强的特点,可作为
2. 1 非梅毒螺旋体抗原血清试验 非梅毒螺旋体 梅毒的确证试验。 但对伴有 HIV 感染的神经梅毒
抗原试验是用一定比例的卵磷脂、牛心肌心磷脂及 会出现假阳性。 TPHA 与 TPPA 原理基本相似,TP-
胆固醇混合物为抗原,与梅毒螺旋体感染机体过程 PA 是 TPHA 的改良版,用玫瑰红色的明胶颗粒替换
中释放的类脂抗原刺激机体产生的抗类脂抗原抗体 了 TPHA 中使用的红细胞,使结果更易于肉眼观察,
(反应素)结合发生抗原-抗体反应,出现凝集颗粒为 两法对各个时期的梅毒检测的敏感性均很高,多用
阳性反应。 主要有性病研究实验室试验( Venereal 于梅毒筛查阳性结果的确认。
disease research laboratory, VDRL)、不加热血清反应 随着分子生物学技术的快速发展,采用基因工
素试验(Unheated serum reagin test,USR)、快速血浆 程重组技术表达具有高度免疫原性的梅毒螺旋体膜
反应素(Rapid plasma reagin, RPR)纸片试验、甲苯 蛋白,开发出许多重组抗原梅毒血清学试验。
胺红不加热试验(Toludine red unheated serum test, 2. 2. 1 梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验( TP-ELI-
TRUST)。 据文献[5] 报道,VDRL 是目前唯一推荐 SA) TP-ELISA法是将纯化及超声处理的梅毒螺旋
用于检测脑脊液(Cerebro-spinal fluid, CSF) 反应素 体特异性抗原包被在微孔板上, 加入患者血清和用
的试验,这对神经梅毒的诊断具有重要价值。 Gu 辣根过氧化物酶标记的抗人 IgG 抗体,利用酶免疫
等 [6] 通过比较分析 CSF-TRUST 和 CSF-VDRL 检测 检测患者血清中抗 TP 特异性抗体,或者采用双抗
神经梅毒性能特征后,得出 CSF-TRUST 也可作为 原夹心法,加入患者血清后,再加入与微孔板包被蛋
CSF-VDRL 检测神经梅毒 备 选 试 验 方 法 的 结 论。 白一致的辣根过氧酶标记的特异性抗原,利用酶免
USR 是 VDRL 试验的改良,目前在国内广泛被使 疫检测患者血清中的梅毒螺旋体特异性抗体,以重
(Dark-field microscope,DFM)检查、直接免疫荧光试 用 [7] ,但由于结果主观判断强,容易出现假阳性和
验( Direct immuno fluorescence assay,DFA) 以及多 假阴性,因此目前常用于梅毒定性和半定量试验。
功能显微诊断仪(Multi-function microscopy diagnosis RPR 和 TRUST 也为 VDRL 试验的改良版,都是分别
instrument,MDI) 检测等。 DFM 可直接观察病灶分 在抗原中加入活性炭颗粒和甲苯胺红颗粒作为指示
泌物中的梅毒螺旋体,是诊断早期梅毒的有效方法, 物,肉眼易于判断实验结果,故临床上使用也比较广
但因其敏感性常较低,且由于梅毒螺旋体形态与常 泛,目前常作为梅毒的筛选,梅毒患者治疗后滴度的
分布于口腔、直肠部位的齿垢密螺旋体(Treponema 检测及疗效观察。 以上方法虽可适用于各期梅毒,
denticola)、屈折密螺旋体( Inflectional treponema) 和 但对一期梅毒早期、晚期梅毒及经治疗后的梅毒患
蚀疮溃疡密螺旋体(Treponema phagedenis)等非常相 者、潜伏期梅毒和神经性梅毒敏感性相对较差,特异
似,不易区分,因此此法对口腔、直肠病灶部位样本 性也不强,且由于多种疾病患者(如某些急性感染
不适用 [2] 。 DFA 是借助荧光显微镜观察经荧光标 性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤患者) 及怀孕早期妇
记处理的样本中梅毒螺旋体的一种技术方法,较之 女、老年人群等都可能存在类似的类脂质抗体,常会
暗视野显微观察阳性率有所提高,且还可以对病理 发生低滴度生物学假阳性反应 [8] ,需要结合梅毒螺
组织切片进行检查,但该法对实验人员的技术要求 旋体抗原血清试验确证,并结合临床表现进行鉴别。
较高,目前还没有在实验室广泛使用 [3] 。 MDI 是一 2. 2 梅毒螺旋体抗原血清试验 传统的梅毒螺旋
种集相差对比、暗视野及偏振光为一体的可变投影 体抗原血清试验包括荧光密螺旋体抗体吸收试验
显微诊断系统,可直接从患者身上获得样本且不需 (Fluorescent treponemal antibody absorption test,FTA-
做任何的预处理,直接用该仪器进行检测诊断的一 ABS)、 梅毒螺旋体血凝试验 ( Treponema pallidum
种方法 [4] 。 hemagglutination assay,TPHA)、梅毒螺旋体颗粒凝
2 血清学检测梅毒 集试 验 ( Treponema pallidum particle agglutination,
TPPA),它们都是以梅毒螺旋体 Nichols 株全病原体
梅毒血清学检查主要用于二期和三期梅毒的诊 作为抗原。 FTA-ABS 法以 Nichols 株全病原体作抗
断,对于评判梅毒病程的发展、预后以及临床治疗药 原,与加入经吸收剂处理过的患者待测血清形成抗
物的疗效都有着十分重要的意义。 梅毒血清学试验 原抗体复合物,用荧光素(FTTC)标记的抗人免疫球
包括非梅毒螺旋体抗原试验和梅毒螺旋体抗原试验 蛋白追踪,抗原抗体复合物在荧光显微镜下发出绿
两大类。 前者常用于临床筛选及疗效的观察,后者 色的荧光,即为阳性。 该法被认为是梅毒检验的
主要是用于判定试验。 “金标准”,具有特异性高、敏感性强的特点,可作为
2. 1 非梅毒螺旋体抗原血清试验 非梅毒螺旋体 梅毒的确证试验。 但对伴有 HIV 感染的神经梅毒
抗原试验是用一定比例的卵磷脂、牛心肌心磷脂及 会出现假阳性。 TPHA 与 TPPA 原理基本相似,TP-
胆固醇混合物为抗原,与梅毒螺旋体感染机体过程 PA 是 TPHA 的改良版,用玫瑰红色的明胶颗粒替换
中释放的类脂抗原刺激机体产生的抗类脂抗原抗体 了 TPHA 中使用的红细胞,使结果更易于肉眼观察,
(反应素)结合发生抗原-抗体反应,出现凝集颗粒为 两法对各个时期的梅毒检测的敏感性均很高,多用
阳性反应。 主要有性病研究实验室试验( Venereal 于梅毒筛查阳性结果的确认。
disease research laboratory, VDRL)、不加热血清反应 随着分子生物学技术的快速发展,采用基因工
素试验(Unheated serum reagin test,USR)、快速血浆 程重组技术表达具有高度免疫原性的梅毒螺旋体膜
反应素(Rapid plasma reagin, RPR)纸片试验、甲苯 蛋白,开发出许多重组抗原梅毒血清学试验。
胺红不加热试验(Toludine red unheated serum test, 2. 2. 1 梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验( TP-ELI-
TRUST)。 据文献[5] 报道,VDRL 是目前唯一推荐 SA) TP-ELISA法是将纯化及超声处理的梅毒螺旋
用于检测脑脊液(Cerebro-spinal fluid, CSF) 反应素 体特异性抗原包被在微孔板上, 加入患者血清和用
的试验,这对神经梅毒的诊断具有重要价值。 Gu 辣根过氧化物酶标记的抗人 IgG 抗体,利用酶免疫
等 [6] 通过比较分析 CSF-TRUST 和 CSF-VDRL 检测 检测患者血清中抗 TP 特异性抗体,或者采用双抗
神经梅毒性能特征后,得出 CSF-TRUST 也可作为 原夹心法,加入患者血清后,再加入与微孔板包被蛋
CSF-VDRL 检测神经梅毒 备 选 试 验 方 法 的 结 论。 白一致的辣根过氧酶标记的特异性抗原,利用酶免
USR 是 VDRL 试验的改良,目前在国内广泛被使 疫检测患者血清中的梅毒螺旋体特异性抗体,以重
